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以下是關(guān)于小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明:
BS-2216 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。預(yù)先包被sMHC-2捕獲抗體的微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體,經(jīng)溫育洗滌后,通過TMB顯色反應(yīng)測(cè)定吸光度(OD值),顏色深淺與sMHC-2濃度呈正相關(guān)?。
二、試劑盒組成
微孔酶標(biāo)板?:預(yù)包被抗體(96孔或48孔配置)
標(biāo)準(zhǔn)品?:濃度梯度溶液(通常0.3mL×6管)
檢測(cè)抗體-HRP?:辣根過氧化物酶標(biāo)記物(10mL/5mL)
洗滌緩沖液?:20×濃縮液需稀釋使用?
顯色液?:底物A/B各3-6mL?
終止液?:酸性溶液(6mL/3mL)?
三、樣本處理
血清?:血液離心1000-3000×g 10分鐘,避免溶血?;
血漿?:EDTA/肝素抗凝,離心后取上清?;
組織勻漿?:按1:9比例加PBS勻漿,3000×g離心10分鐘?;
保存?:分裝凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融?。
四、操作步驟
平衡?:取出板條室溫平衡20分鐘,剩余板條密封4℃保存?;
加樣?:
空白孔:不加樣
標(biāo)準(zhǔn)品孔:50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔:50μL待測(cè)樣本?;
孵育?:加入HRP檢測(cè)抗體100μL,37℃孵育60分鐘?;
洗滌?:用洗滌液洗板5次,拍干?;
顯色?:每孔加底物A/B各50μL,37℃避光反應(yīng)15分鐘?;
終止?:加終止液50μL,15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值?。
五、注意事項(xiàng)
有效期?:未開封試劑盒通常6個(gè)月(2-8℃保存)?;
線性范圍?:需按說明書標(biāo)曲濃度操作,超出范圍可能導(dǎo)致誤差?;
應(yīng)用限制?:僅限科研使用,不可用于臨床診斷?。
如需具體品牌試劑盒的完整說明書,可參考廠商提供的詳細(xì)文檔(如本生BS-2216或天正信達(dá)TZXD-2216?)。
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